产品货号:
MQ0037
中文名称:
BL21(DE3)化学感受态细胞
英文名称:
BL21(DE3)Chemically Competent Cell
产品规格:
10×100μl|50×100μl
发货周期:
1~3天
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BL21(DE3)感受态细胞用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。λ噬菌体DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶,该区整合于BL21的染色体上,所以称为BL21(DE3)。可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,用于pET系列,pGEX,pMAL等质粒的蛋白表达。
基因型:F- ompT hsdSB(rB- mB-) gal dcm(DE3)
转化效率:达108cfu/μg(经pUC19质粒检测)
组分 | 10×100μL | 50×100μL |
BL21(DE3)化学感受态细胞 | 10×100μL | 50×100μL |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:-80℃
- 感受态细胞最好在冰上融化。
- 混入质粒时应轻柔操作。
- 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
- 诱导时,IPTG浓度可选(0.1~2mM均可)。
- 为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。
- 取100μL冰上融化的BL21(DE3)感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。
- 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
- 向离心管中加入700μL不含抗生素的无菌2YT或LB培养基,混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。
- 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μL左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
- 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
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